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上海起發worthington 膠原酶現貨說明書

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上海起發worthington 膠原酶現貨說明書


Collagenase


粗膠原酶制劑含有兩種不同的膠原酶的幾種亞型,一種巰基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一種胰蛋白酶樣酶和一種氨基肽酶。這種膠原分解和蛋白分解活性的結合有效地分解細胞間基質,細胞間基質是組織分解的重要部分。復合物的一種成分是一種水解酶,它優先降解天然膠原中的螺旋區,位于Pro-Y-Gly-Pro序列中的Y-Gly鍵,其中Y最常見的是中性氨基酸。這種裂解產生易于進一步消化肽酶的產物。粗膠原酶被半胱氨酸、EDTA或鄰菲咯啉等金屬螯合劑抑制,但不被DFP抑制。α2-巨球蛋白(一種大的血漿糖蛋白)也對其有抑制作用。酶活性需要Ca2+。每種膠原酶的特定酶譜都與獲得研究細胞的組織(或細胞的用途)相關,因此Worthington建立了幾種類型的粗膠原酶:1型、2型、3型和4型。

•1型粗膠原酶具有膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。

•2型含有較高相對水平的蛋白酶活性,尤其是梭菌蛋白酶。

•類型3含有低水平的次級蛋白酶。

•類型4的胰蛋白酶活性特別低,以限制對膜蛋白和受體的損害。

•5型含有較高的膠原酶和酪蛋白酶值。

•6型含有高膠原酶活性,酪蛋白酶與膠原酶的比例約為2:1。與I型(col G)相比,設計用于II型(colH)膠原酶的富集。

•7型膠原酶和酪蛋白酶活性比1型和2型膠原酶高4倍。

•純化的膠原酶,代碼:CLSPA,含有低的次級蛋白水解活性和高膠原酶活性。

新無動物型AFA、AFB和AFC、STZ1和STZ2膠原酶來源于不含動物成分的培養基中生長的培養物,設計用于必須防止引入潛在動物源病原體的生物加工應用。次級蛋白酶的水平類似于1型和2型膠原酶。

•CLSAFA是最初的AFA等級,旨在具有與1型和2型膠原酶相似的膠原酶和次級蛋白酶。

•CLSAFB含有比CLSAFA更高的膠原酶和酪蛋白酶活性。

•CLSAFC具有特別低的胰蛋白酶活性,類似于4型膠原酶。

•STZ1和STZ2,0.22μ過濾STEMxyme®AOF膠原酶/中性蛋白酶(Dispase®)混合物,用于原代和干細胞分離。

沃辛頓還提供預包裝形式的每種0.22µm過濾制劑,用于直接重組和用于細胞分離和培養程序。酶類型與不同組織的有效性之間的相關性很好,部分原因是使用參數的變化。然而,大多數研究人員認為粗膠原酶批次的組織分型是一項有價值的服務。沃辛頓膠原酶和污染物分析的詳細描述可在沃辛頓酶手冊中找到。此外,組織特異性參考和詳細的分離條件可在沃辛頓組織分離指南中找到。

膠原酶測定是Mandl的改進,其中膠原酶與天然膠原孵育5小時,并使用Moore和Stein,JBC,176367,(1948)比色茚三酮法測定膠原分解程度。釋放的氨基酸表示為每毫克膠原酶微摩爾亮氨酸。

用途:粗膠原酶廣泛用于酶促原代細胞分離和組織分離過程。大多數研究人員使用粗膠原酶制劑,如1型、2型、3型和4型,或色譜純化的膠原酶(代碼:CLSPA);后者通常與二級酶(如彈性蛋白酶、透明質酸酶等)結合。為了獲得最佳結果,蛋白水解活性的精確混合物必須適合待分離的組織。不同組織的類型和有效性之間的相關性很好,可能部分取決于使用參數和目標以及批次間的差異。有關更多信息,請參閱膠原酶采樣程序信息。沃辛頓還出版了《組織解離指南》,該指南提供了用于這些應用的酶的額外信息,以及多種細胞和組織類型的特定參考。

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細胞分離Optimizi


描述:

STEMxyme®1,膠原酶/中性蛋白酶(Dispase)

來源:溶組織梭菌/多粘菌芽孢桿菌

無動物溶組織梭菌膠原酶(代碼:CLSAFB)和無動物多粘菌中性蛋白酶的特殊組合,每毫克干重至少含有250 CLS單位和1000酪蛋白酶單位。設計用于干細胞和其他原代細胞分離和生物處理應用,必須防止引入潛在的動物源性病原體。

儲存于2-8°C。

≥250 CLS/1,000 CAS units per milligram dry weight

貨號:LS004106


worthington LS004106

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